|
Taq polimerase
 Taq polimerase (disingkat Taq pol) merupakan enzim DNA polimerase (EC 2.7.7.7) stabil suhu pertama yang berhasil dipurifikasi dari bakteri termofil ekstrem Thermus aquaticus yang hidup pada dinding geiser vulkanik. Enzim Taq pol pertama kali dipurifikasi pada tahun 1976.[butuh rujukan] Enzim ini bebas dari fosfomomonoesterase, fosfodiesterase, dan aktivitas eksonuklease utas tunggal.[butuh rujukan] Suhu optimum Taq pol adalah 80 °C.[butuh rujukan] Untuk dapat beraktivitas maksimum, enzim ini memerlukan keempat deoksiribonukleotida dan DNA timus anak sapi yang diaktivasi.[butuh rujukan] Selain itu, dibutuhkan juga kofaktor kation divalen yaitu Mg2+ atau paling tidak Mn2+.[butuh rujukan] Kation monovalen pada konsetrasi 0.1 M tidak menunjukkan efek inhibitor yang signifikan.[butuh rujukan] pH optimum dari enzim ini adalah 8.0 pada buffer tris(hidroksimetil)aminomethan-hidroklorida.[butuh rujukan] Massa molekuler pertama kali diestimasi mencapai 63.000-68.000, dengan metode sentrifugasi gradien sukrosa dan filtrasi gel menggunakan Sephadex G-100. Ukuran yang kecil, tahan suhu tinggi, dan memiliki sedikit saja aktivitas nuklease adalah faktor-faktor yang membedakan enzim polimerase ini dengan DNA polimerase dari E. coli.[1] Enzim Taq pol memiliki aktivitas 5’—3’ eksonuklease.[butuh rujukan] Namun, struktur domain aktivitas 3’—5’ eksonuklease telah teralterasi sehingga aktivitas tersebut tidak terdapat dalam enzim termostabil seperti Taq pol.[2] Taq pol sangat luas penggunaannya dalam teknik PCR meskipun telah ditemukan sumber DNA polimerase lainnya karena sifatnya yang termostabil.[butuh rujukan] Referensi
|
||||||||||||||||||||
